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正辛酸在蛋白質(zhì)消化中應(yīng)用的研究

發(fā)布時間:2021-08-11

蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ) ,食品中蛋白質(zhì)含 量的高低是評價食品營養(yǎng)成分的重要指標(biāo)之一。

蛋白質(zhì)的測定有多種方法 ,但絕大部分方法均需將食品經(jīng)過硫酸消化處理 ,將有機氮轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機氮 ,然后 進(jìn)行測定。因此 ,樣品的消化處理是測定蛋白質(zhì)的重 要步驟 ,但在消化過程中樣品會炭化變黑 ,產(chǎn)生大量 泡沫 ,使黑色物質(zhì)上升過高而濺出 ,造成損失 ,影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

通常采取的是減小火力并加入 消泡劑 ,傳統(tǒng)加入的液體石蠟消泡效果較差 ,導(dǎo)致消 化時間長 ,消泡效果并不理想。而實踐中常采用正辛 酸做消泡劑,不但可以減小泡沫產(chǎn)生 ,而且省時省 力 ,效果理想。本研究就正辛酸對測定結(jié)果的影響進(jìn)行試驗研究 ,以期為正辛酸的正確使用提供參考。

1 材料、試劑與方法

1. 1 儀器與試劑 石英消化管 ,凱氏定氮儀 ,混合消化液  ( H2 O2 ∶ H2 SO4∶ H2O= 1∶ 2∶ 3) ,混合催化劑 ( Cu SO4∶ K2 SO4= 1∶ 10,研細(xì) ,備用 ) ,正辛酸 (化學(xué)純 ,中國 醫(yī)藥 (集團 )上?;瘜W(xué)試劑公司生產(chǎn) ) ,其他試劑均為 分析純 (廣州化學(xué)試劑公司生產(chǎn) )。

1. 2 材料的制備

1. 2. 1 試樣的制備 樣品來源于深圳各口岸送檢 樣品 ,烘干 ,粉碎 ,縮分后備用。

1. 2. 2 試液的制備 對照組。 精確稱取均勻樣品 0. 2~ 2. 0 g (約相當(dāng)于氮 30~ 40 mg ) ,小心移入干 燥的消化管底部 ,加入混合催化劑 1. 5 g ,同時小心 加入混合消化液 20 m L,搖勻 ,斜置于電爐上進(jìn)行消 化。 控制火力使溶液保持穩(wěn)定的沸騰狀態(tài)。 當(dāng)溶液 呈藍(lán)綠色透明澄清后 ,再加熱 30 min,冷卻后將消 化液轉(zhuǎn)入 100 mL容量瓶中 ,搖勻 ,加水定容 ,備用。

正辛酸組。 消化液在加熱前滴加 3~ 4滴正辛 酸 ,在加熱過程中消化液變黑 ,有大量泡沫產(chǎn)生時再 滴加 1~ 2滴正辛酸 ,泡沫迅速消退。如此反復(fù) ,直至 泡沫停止。 溶液保持穩(wěn)定的沸騰狀態(tài)。 當(dāng)溶液呈藍(lán) 綠色透明澄清后 ,再加熱 30 min,冷卻后將消化液 轉(zhuǎn)入 100 mL容量瓶中 ,搖勻 ,加水定容 ,備用。 空白組試液。 同時做一空白試液 ,除不加樣品 外 ,從加入催化劑開始操作與正辛酸組相同。

1. 3 試驗方法

1. 3. 1 對照試驗 正辛酸組和對照組以及空白組 的消化液分別用凱氏定氮裝置蒸餾和吸收 ,最后用 H2 SO4 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定吸收液扣除空白值 ,計算出含 氮量。

公式如下: N ( mg g- 1 ) = (cH2SO4 × VH2 SO 4 ) × 10- 3× MN 2G 式中 , N 表示樣品中的氮含量。 cH2SO4表示加入 H2 SO4 的摩爾濃度 ( mo l· L- 1 ) ; V H2SO4表示加入 H2 SO4 的體積數(shù) ( mL); MN 表示 N 原子的摩爾質(zhì)量 ( g· mo l- 1 ) ; G表示樣品質(zhì)量 (g )。

1. 3. 2 回收率試驗 將已知含氮量的不同樣品各 精確稱取 0. 2~ 2. 0 g ,并在每份樣品中加入一定量 的 ( N H4 ) 2 SO4 ,樣品處理同前。消化液用凱氏定氮裝 置蒸餾和吸收 ,最后用 H2 SO4 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定吸收消 化液 ,計算出含氮量。 公式同前。

1. 3. 3 樣品含氮量的精密度 精確稱取不同的均 勻樣品 0. 2~ 2. 0 g (約相當(dāng)于氮 30~ 40 mg ) ,進(jìn)行 消化 ,方法同前。將冷卻后的消化液轉(zhuǎn)入 100 mL容量瓶中 ,搖勻 ,加水定容 ,備用。消化液用凱氏定氮裝 置蒸餾和吸收 ,最后用 H2 SO4 標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定吸收消 化液 ,計算出含氮量。

2 結(jié)果與討論

2. 1 對照試驗 在不同樣品中加入一定量的正辛酸對結(jié)果的影 響 (結(jié)果為 5次平均值 )列于表 1。從表 1結(jié)果看 ,相 對誤差在 - 0. 92~ + 0. 66之間 ,說明不同含氮量的 樣品在消化時加入正辛酸后并不影響測定結(jié)果。

2. 2 回收率試驗 在樣品中加入一定量的 ( N H4 ) 2 SO4 ,回收率試 驗結(jié)果 (表 2)表明 ,回收率為 99. 8% ~ 100. 7% ,說 明不同含氮量的樣品在消化時加入正辛酸不影響測 定結(jié)果。

2. 3 精密度試驗 對不同樣品進(jìn)行精密度重復(fù)測定 ,結(jié)果 (表 3) 表明 ,精密度為 0. 222~ 0. 508,說明同一樣品在消 化時加入正辛酸并不影響測定結(jié)果。

3 小 結(jié) 試驗證明采用正辛酸做消泡劑 ,能夠縮短蛋白 質(zhì)消化時間 ,減少損失 ,方法簡便 ,安全 ,快捷 ,又不 影響測定結(jié)果 ,效果比液體石蠟要好。 尤其對脂肪 , 糖分含量較高的樣品 ,效果更為顯著